*組步移-友名生物(在線咨詢)
當(dāng)dna聚合酶 iii沿著滯后鏈模板移動(dòng)時(shí),*組步移,由特異的引發(fā)酶催化合成的rna引物即可以由dna聚合酶 iii所延伸,合成dna。當(dāng)合成的dna鏈到達(dá)*次合成的岡崎片段的位置時(shí),滯后鏈模板及剛合成的岡崎片段從dna聚合酶 iii上釋放出來。由于copy叉繼續(xù)向前運(yùn)動(dòng),便又產(chǎn)生了一段單鏈的滯后鏈模板,它重新環(huán)繞dna聚合酶 iii,通過dna聚合酶iii開始合成新的滯后鏈岡崎片段。通過這種機(jī)制,前導(dǎo)鏈的合成不會(huì)超過滯后鏈太多,這樣引發(fā)體在dna鏈上和dna聚合酶 iii以同一速度移動(dòng)。在copy叉附近,形成了以dna聚合酶 iii二聚體、引發(fā)體和解旋酶構(gòu)成的類似核糖體大小的以物理方式結(jié)合成的復(fù)合體,稱為dna copy體。copy體在dna前導(dǎo)鏈模板和滯后鏈模板上移動(dòng)時(shí)便合成了連續(xù)的dna前導(dǎo)鏈,以及由許多岡崎片段組成的滯后鏈。當(dāng)岡崎片段形成后,dna聚合酶i通過其 5→3外切酶活性切除岡崎片段上的rna引物,并利用后一個(gè)岡崎片段作為引物由 5→3合成dna填補(bǔ)缺口。*后由dna連接酶將岡崎片段連接起來,形成完整的dna滯后鏈。
遺傳控制中大的困難并不是dna的,而是需要被的特異dna段的分離 [2] 。如果以*為目的,特異dna段的分離將大大有助于獲得與遺傳信息同樣多的相關(guān)的*產(chǎn)物,一般說這些*產(chǎn)物均為蛋白質(zhì)多肽,因此*該蛋白質(zhì)的對(duì)于測(cè)定和沉淀蛋白質(zhì)及其前體有重要用途,甚至可用于了解蛋白質(zhì)分子量 [2] 。amv反轉(zhuǎn)錄酶和mlv反轉(zhuǎn)錄酶都必須有引物來起始dna的合成。cdna合成的引物是與真核細(xì)胞mrna分子3’端poly(a)結(jié)合的12~18個(gè)核苷酸長(zhǎng)的oligo(dt)。
dna連接酶與dna聚合酶的區(qū)別?
形成方式不同
dna連接酶是在兩個(gè)dna部分片段之間形成*二酯鍵,不是在單個(gè)核苷酸與dna部分片段之間形成*二酯鍵。dna連接酶都不能催化兩條游離的dna鏈相連接。
dna聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的dna1片段上,形成*二酯鍵。dna聚合酶起到催化劑的作用,催化原來的dna進(jìn)行復(fù)1制,然后將原來的dna和復(fù)1制以后的dna進(jìn)行模板配對(duì)后,連接聚合在一起,就可以形成新的dna鏈。
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