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熒光分光光度計(jì)基本原理
由氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后,edinburgh熒光光譜儀代理,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光.不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級(jí)的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),國(guó)產(chǎn)熒光光譜儀代理,其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即if=kc,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。
熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長(zhǎng)掃描范圍一般是190~650nm,石家莊熒光光譜儀代理,發(fā)射波長(zhǎng)掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
熒光光譜
1852年stokes在考察奎寧和葉綠素的熒光時(shí),用分光計(jì)觀察到熒光波長(zhǎng)比入射光波長(zhǎng)稍長(zhǎng)些。經(jīng)過(guò)判明,這種現(xiàn)象不是由光的漫射作用引起的,而是這些物質(zhì)在吸收光能后重新出的不同波長(zhǎng)的光。因此,他引入熒光是光發(fā)射的概念。熒光光譜先要知道熒光,熒光是物質(zhì)吸收電磁輻射后受到激發(fā),受激發(fā)原子或分子在去激發(fā)過(guò)程中再發(fā)射波長(zhǎng)與激發(fā)輻射波長(zhǎng)相同或不同的輻射。當(dāng)激發(fā)光源停止輻照試樣以后,再發(fā)射過(guò)程立刻停止,這種再發(fā)射的光稱為熒光。
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